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上海奥陆生物科技有限公司

悬浮细胞处理方法

细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的zui好办法。从细胞资源中心获得细胞回到自己的实验室后，先打开外包装，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内，严格无菌操作。

将细胞悬液移入离心管，1000rpm/min 离心5分钟。上清培养液移入无菌瓶中，留待日后培养用。离心下来的细胞T25瓶中加培养液6-8ml，混匀后放入37℃、5%CO2孵箱培养。

传代方法：

细胞生长至1X10⁶/ml时（一般情况），将细胞悬液移入离心管800-1000rpm/min离心5分钟，然后弃上清，加新鲜培养液混匀，1瓶分成3瓶（或6瓶-10瓶），每T25瓶加培养基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培养

该细胞使用培养基：1、DMEM(高糖)    2、R1640    3、R1640（改良）    4、MEM(EBSS)    5、MEM(NEAA)    6、D/F12    7、F12    8、F12K    9、MaCcoy‘5A    10、L15    

血清要求：1、20%FBS    2、15%FBS    3、10%FBS    4、5%FBS    5、2.5%FBS    6、15%HS    7、10%HS    8、5%HS    9、2.5%HS    10、10%CCF(灭活)

冻存液：常规培养液+20%FBS+8%DMSO